细胞增殖是指细胞在周期调控因子的作用下,通过DNA复制、RNA转录和蛋白质合成等复杂反应而进行的分裂系列过程。
对细胞的增殖进行检测,是一种对生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验,以及肿瘤放射敏感性测定等,不可或缺的实验手段。目前主要有两种方式检测细胞增殖能力的方法:一种是直接的方法,通过直接测定进行分裂的细胞数来评价细胞的增殖能力。例如:BrdU细胞增殖检测;EdU细胞增殖检测。另一种是间接的方法,即细胞活力检测方法,通过检测样品中健康细胞数目来评价细胞的增殖能力。例如:MTT法、CCK8试剂盒法以及CTG法。
CTG法
ATP腺嘌呤核苷三磷酸(简称三磷酸腺苷)参与生物体内多种酶促反应,是活细胞新陈代谢的一个指标,其含量直接反应了细胞的数量及细胞状态:实验过程中向细胞培养基加入CellTiter-Glo试剂,利用外源的萤火虫荧光素与荧光素蛋白,以细胞内的ATP作为能量来源 消耗ATP发出荧光,测量发光值,在光信号和体系中,发光值与ATP量成正比,而且CTG 发光法通过 ATP 含量来进行细胞计数或活力测定不受化合物自发荧光的影响。同普通的MTT和CCK8相比,CTG法具有反应灵敏、反应快以及能持续较长的信号持续时间等优点,是细胞增殖测定,细胞活力测定和细胞毒性高通量筛选分析的理想选择。