细胞因子特点|技术参数|运用领域
一、细胞因子的概念和分类
细胞因子(Cytokine)是由免疫细胞或非免疫细胞合成和分泌的小分子多肽。天然免疫和特异性免疫的效应阶段大部分是由细胞因子介导的。细胞因子作为免疫活性细胞间相互作用的介质(mediator),对免疫应答的发生、调节及效应等均起重要作用。
包括:淋巴因子(Lymphokine)、单核因子(Monokine)、白细胞介素(IL)、集落刺激因子(CSF)、干扰素(IFN)、肿瘤坏死因子(TNF)、趋化因子(Chemokine)、TGFb(Transforminggrowth factor b)超家族、生长因子(Growth factor)。
二、细胞因子的产生
1、由活化的淋巴细胞(特别是Th1、Th2细胞)、活化的单核巨噬细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等产生,
2、由肿瘤细胞,如Jurkat细胞、VWHI-3细胞、骨髓瘤细胞等产生,
3、由通过基因工程技术在工程细胞生产重组细胞因子。自身产生的细胞因子是极少的,所以科研用的细胞因子绝大多数都是通过此途径来的,而且为了保持其稳定性和方便运输,往往制作成冻干粉状。
三、细胞因子的功能
细胞因子常与靶细胞表面特异性受体结合而发挥效应,相当于半抗原,所以也具有种属特异性。
1、作为天然免疫的介质,具有此种功能的细胞因子是由感染性因子刺激单核巨噬细胞产生的;
2、参与淋巴细胞的活化、生长和分化,这些细胞因子是在T细胞对特异性抗原识别的过程种诱发产生的;
3、在免疫-炎症反应中,对炎性细胞起调节作用,细胞因子激活T细胞在特异性抗原识别过程中诱发产生的非特异性炎性细胞;
4、刺激未成熟白细胞的生长和分化,此种细胞因子是由被激活的淋巴细胞和其他细胞产生的。一种细胞因子可能表现出一种以上的生物学功能。
四、细胞因子的应用
1、在临床上的应用:重组细胞因子用于治疗各种疾病,如肿瘤、感染、造血功能障碍等;细胞因子抑制剂用于治疗炎症、自身免疫病、移植排斥、休克等;细胞因子检测用于判断机体免疫功能,进行疾病的辅助诊断,判断病程,预后,评价治疗效果;重组细胞因子可作为佐剂与疫苗共用,预防感染性疾病;细胞因子基因治疗。
2、有些细胞因子是体外细胞培养时必须的营养物质,尤其是目前兴起无血清培养基使细胞因子得到更广泛的应用。
五、重组细胞因子的使用
1、因为它的作用原理,使用时注意种属特异性。
2、重组:建议在启用前要把装有冻干粉的小瓶简单离心一下。重组在无菌蒸馏水或含0.1 %BSA缓冲水溶液中进行,以浓度为0.1-1.0毫克/毫升为宜,然后再分成若干份并保存于-20度以下,需要时再以适当的缓冲液进一步稀释。
3、贮存:冻干制剂稳定在2-8度,若长期保存最好以冻干粉的形式保存于-20度。重组后,在2-8 C可以保存一周。为保持更大的稳定性,把重组物分成若干份并保存在-20度到-70度,并避免重复冻结/解冻的循环。